磺胺多残留ELSIA检测试剂盒说明书

1 原理及用途

本试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测组织、血清、蜂蜜、牛奶等样本中的磺胺类药物（SulfonamideS，SAS），试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，加入标准品或样品溶液，样本中的磺胺类药物和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗磺胺类药物抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含磺胺类药物含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中磺胺类药物的残留量。

2 技术指标

2.1 试剂盒灵敏度：0.5ppb(ng/ml)

2.2 反应模式：25℃，45min～15min。

2.3 检测下限：

组织（高检测限方法）……………………0.5ppb

组织（低检测限方法）……………………2.5ppb

血清、尿液………………………………2ppb

蜂蜜………………………………………0.5ppb

牛奶………………………………………10ppb

2.4 交叉反应率：

磺胺嘧啶（SD或SDZ）…………………………100%

磺胺间甲氧嘧啶/磺胺六甲氧嘧啶（SMM）………97%

磺胺甲噁唑（SMZ）………………………………100%

磺胺甲基嘧啶（SM1）………………………………92%

酞酰磺噻唑（PST）…………………………………110%

磺胺甲噻二唑（SMT）………………………………110%

磺胺对甲氧嘧啶（SMD）……………………………66%

磺胺异噁唑(SIZ)……………………………………95%

磺胺二甲基嘧啶（SM2）……………………………140%

磺胺多辛（SDM2）……………………………………80%

磺胺喹噁啉（SQX）…………………………………160%

磺胺甲氧哒嗪（SMP）…………………………………80%

磺胺氯哒嗪（SPDZ）…………………………………110%

磺胺苯酰（SML）………………………………………104%

磺胺噻唑（ST）………………………………………75%

2.5 样本回收率：

组织、蜂蜜………………………………………95±25%

尿样、牛奶、血清………………………………85±25%

3 试剂盒组成

酶标板………………………………………96孔

标准品（绿盖）：各1ml

0ppb、0.5ppb、1.5ppb、4.5ppb、13.5ppb、40.5ppb

高标准品（红盖）：1ppm…………………1ml

抗体工作液（蓝盖）………………………10ml

酶标记物（红盖）…………………………7ml

底物液A（白盖）……………………………7ml

底物液B（黑盖）……………………………7ml

终止液（黄盖）………………………………7ml

20X浓缩洗涤液（透明盖）…………………40ml

2X浓缩复溶液（黄盖）………………………50ml

说明书………………………………………1份

4 需要的器材和试剂

4.1 仪器：酶标仪、打印机、均质器 、氮气吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g）

4.2 微量移液器：单道20µl-200µl，100µl-1000µl、多道300µl

4.3 试剂：乙酸乙酯、正己烷、二氯甲烷、乙腈、Na2HPO4·12H2O、NaOH 、浓HCL 、NaH2PO4·2H2O

5 样本前处理

5.1 样本处理前须知：

    实验中必须使用一次性吸头，在吸取不同的试剂时要更换吸头。实验之前须检查各种实验器具是否干净，必须使用洁净实验器具，以避免污染干扰实验结果。

5.2 配液：

配液1：0.2M  NaOH溶液

    0.8gNaOH用去离子水100ml溶解

配液2：0.02M  PB缓冲液

    称取2.58g Na2HPO4·12H2O和0.44g NaH2PO4·2H2O加去离子水500ml溶解。

配液3：0.5M盐酸溶液

    4.3ml浓HCL加入去离子水定容至100ml混匀。

配液4：乙腈-二氯甲烷混合液